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人T細(xì)胞生長因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA試劑盒實(shí)驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/5/13瀏覽:77次
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  以下是天津本生技術(shù)小編關(guān)于人T細(xì)胞生長因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA試劑盒的實(shí)驗使用說明綜合整理:

  BS-0292人T細(xì)胞生長因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA試劑盒

  一、實(shí)驗原理

  采用雙抗體夾心法:包被抗體與樣本中TCGF-Ⅲ結(jié)合后,再與HRP標(biāo)記的檢測抗體形成復(fù)合物,通過TMB顯色反應(yīng)(藍(lán)色→黃色)測定OD值,顏色深度與TCGF-Ⅲ濃度呈正相關(guān)。

  二、試劑盒組成

  標(biāo)準(zhǔn)品?:2700ng/L(0.5ml/瓶)

  酶標(biāo)包被板?:48孔或96孔規(guī)格

  檢測抗體?:HRP標(biāo)記抗體(3ml/48T或6ml/96T)

  底物系統(tǒng)?:顯色劑A/B液各50μL/孔

  終止液?:50μL/孔

  20×洗滌緩沖液?:需1:20稀釋

  三、樣本處理

  血清?:室溫靜置2小時或4℃過夜后離心(1000g, 20分鐘)

  血漿?:EDTA/肝素抗凝,采集后30分鐘內(nèi)離心(2-8°C, 1000g, 20分鐘)

  細(xì)胞上清?:直接離心(1000g, 20分鐘)

  注:避免反復(fù)凍融及溶血樣本

  四、操作步驟

  平衡試劑?:取出試劑盒室溫平衡20分鐘

  加樣?:

  標(biāo)準(zhǔn)品孔:50μL梯度標(biāo)準(zhǔn)品

  樣本孔:10μL樣本+40μL稀釋液

  孵育?:加入HRP檢測抗體100μL,37℃孵育60分鐘

  洗滌?:用洗滌液洗板5次,每次靜置1分鐘

  顯色?:每孔加底物A/B各50μL,37℃避光孵育15分鐘

  終止與檢測?:加終止液50μL,15分鐘內(nèi)測450nm OD值

  五、注意事項

  溫育需嚴(yán)格控制時間與溫度(37±1℃)

  顯色過淺可延長底物孵育時間

  開封后未用完板條需密封保存(4℃+干燥劑)

  推薦做雙份檢測以減少誤差

  六、適用儀器

  酶標(biāo)儀(450nm)

  精密加樣器(0.5-1000μL范圍)

  如需具體品牌試劑盒(如天正信達(dá)生物、天津本生等)的差異說明,可進(jìn)一步提供信息,以上資料僅供參考,具體可咨詢技術(shù)老師或供應(yīng)商。

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